植物組培快繁的成功與否,除培養(yǎng)材料本身因素外,在很大程度上取決于對培養(yǎng)基的選擇。培養(yǎng)基的種類和成分直接影響到培養(yǎng)材料的生長分化,故應根據(jù)培養(yǎng)植物的種類和部位,選擇適宜的培養(yǎng)基。
培養(yǎng)基(medium)是培養(yǎng)物生長分化的基質,一般由無機營養(yǎng)物、碳源、維生素、生長調節(jié)物質和有機附加物等幾類物質組成。
1培養(yǎng)基的種類
1.1基本培養(yǎng)基和*培養(yǎng)基
根據(jù)其組成,通常分為基本培養(yǎng)基和*培養(yǎng)基?;九囵B(yǎng)基僅含大量元素、微量元素、維生素、氨基酸、糖及水;而*培養(yǎng)基是在基本培養(yǎng)基的基礎上根據(jù)不同的培養(yǎng)要求,添加各種植物生長調節(jié)物質及附加物。
1.2固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基
在配制培養(yǎng)基時,若加入適量的凝固劑(瓊脂)則成為固定培養(yǎng)基;如果不加凝固劑,則為液體培養(yǎng)基。由于固體培養(yǎng)基使用簡便,目前使用最為普遍。
1.3基本培養(yǎng)基的種類及特點
基本培養(yǎng)基的種類非常多,但是較為常用的還是一二十種,如:MS、改良MS、White、改良White、B5、Nitsch、Blaydes、N6、H、VW、改良VW、MT、NT、SH、BL、ER、LS、WS等基本培養(yǎng)基(限于篇幅,需要常用培養(yǎng)基配方表的可以再后臺留言)。
基本培養(yǎng)基種類很多,而且各有各的特點和適用范圍,下面講講最常見的幾種基本培養(yǎng)基的特點:
MS培養(yǎng)基是由Murashige和Skoog為培養(yǎng)煙草材料而設計的。其特點是無機鹽(如鉀鹽、銨鹽及硝酸鹽)的含量和離子濃度均較高,為較穩(wěn)定的平衡溶液,其養(yǎng)分的數(shù)量和比例也較適合,能滿足培養(yǎng)物的營養(yǎng)需求。其廣泛應用于植物組培快繁,效果良好。
LS(Linsmaier和Skoog)培養(yǎng)基和RM(田中)培養(yǎng)基,其基本成均與MS培養(yǎng)基相同,前者去掉甘氨酸、鹽酸吡哆醇和煙酸;后者則把的含量提高到了4950mg/L,把提高到了510mg/L。
White培養(yǎng)基由White為培養(yǎng)番茄根尖而設計的,1963年又作了改良,其特點是無機鹽濃度較低,但硫酸鎂的濃度卻較高。它的使用也較廣泛,主要適用于生根培養(yǎng);無論是用于生根培養(yǎng)還是胚胎培養(yǎng)或一般組織培養(yǎng)都有很好的效果。
B5培養(yǎng)基是由Gamborg等為培養(yǎng)大豆根細胞而設計的。它的主要特點是含有較低的銨鹽,這可能對于不少培養(yǎng)物的生長有抑制作用,而對有些植物如雙子葉植物特別是木本植物,卻更適宜。
N6培養(yǎng)基是由我國的朱至清等為水稻等禾谷類作物花藥培養(yǎng)而設計的。其特點是成本較簡單,且硝酸鉀和硫酸銨含量高,不含鉬。再國內已廣泛應用于小麥、水稻及其他植物的花藥和花藥培養(yǎng)及組織培養(yǎng)等。
SH培養(yǎng)基(Schenk和Hildebrandt)與B5相似,其特點是改硫酸銨為磷酸二氫銨,硝酸鉀含量較高,在不少單子葉和雙子葉植物上應用,效果很好。
VW(Vacin和Went)培養(yǎng)基適合于氣生蘭的培養(yǎng),其特點是總的離子強度稍低;因磷以磷酸鈣形式供給,所以要先用1mol/L的鹽酸溶解后再加入混合溶液中。
H培養(yǎng)基(Bourgin和Nitsch)其大量元素約為MS培養(yǎng)基的一半,氯化鈣稍低;微量元素種類減少,而其他含量較MS為高;維生素種類比MS多,適用于花藥培養(yǎng)。
尼奇培養(yǎng)基(Nitsch)與H培養(yǎng)基成分基本相同,僅生物素比H培養(yǎng)基高10倍,也適用于花藥培養(yǎng)。
還有米勒培養(yǎng)基(Miller)和Blaydes培養(yǎng)基二者成分*相同,適合于大豆愈傷組織培養(yǎng)和花藥培養(yǎng)等。
基本培養(yǎng)基的種類很多,在實際生產實踐中仍要根據(jù)培養(yǎng)物種類和培養(yǎng)目的的不同而選擇不同的培養(yǎng)基,其中以MS培養(yǎng)基的應用最為廣泛。